(1)目視比色法
用眼睛比較溶液顏色的深淺以確定待測組分含量的方法,稱為目視比色法。最常用的是標(biāo)準(zhǔn)系列法。它是用一套質(zhì)料相同、大小形狀相同、帶有刻度、等體積的比色管組成。將一系列不同體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液依次加入比色管中,取一定量的待測溶液置于另一比色管中,然后分別加入等量的顯色劑及其它試劑,最后用水稀釋至刻度(比色管容量有10、25、50、100mL等幾種)。搖勻并放置一定時間待反應(yīng)達(dá)平衡后,從管口垂直向下觀察,比較待測液與標(biāo)準(zhǔn)溶液顏色的深淺。若待測液與某一標(biāo)準(zhǔn)液顏色深度一致,則說明兩者濃度相等;如果待測液的顏色深度介于某相鄰兩標(biāo)準(zhǔn)之間,則取其平均值作為待測液的濃度。
目視比色法儀器簡單、操作簡便、靈敏度也較高、顯色反應(yīng)如不遵從比耳定律也能進(jìn)行。因而它被廣泛應(yīng)用于準(zhǔn)確度要求不高的常規(guī)分析中。
目視比色法的主要缺點(diǎn)是準(zhǔn)確度不高,如果待測溶液中存在第二種有色物質(zhì),甚至無法進(jìn)行測定。另外,由于許多有色溶液顏色不夠穩(wěn)定,標(biāo)準(zhǔn)系列不能久存,經(jīng)常在測定時需同時配制。
(2)光度分析法
通常,將使用光電比色計測定有色溶液的吸光度進(jìn)行定量分析的方法稱為光電比色法,將使用分光光度計進(jìn)行測定的方法稱為分光光度法。兩種方法的測定原理是相同的,所不同的僅在于獲得單色的方法不同,光電比色法是采用濾光片,而分光光度法是利用棱鏡或光柵單色器。由于兩者均基于吸光度的測定,所以可統(tǒng)稱為光度分析法。操作步驟都是測量一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,繪制工作曲線。并在相同條件下,測量待測試樣的吸光度,由工作曲線上查出試樣中待測物的含量。
光度法與目視比色法比較,具有下列優(yōu)點(diǎn):
a.使用儀器代替人眼進(jìn)行測量,消除了人工的主觀誤差,從而提高了準(zhǔn)確度。
b.測定溶液中有其它有色物質(zhì)共存時,可以選擇適當(dāng)?shù)膯紊夂蛥⒈热芤簛硐蓴_,因而可提高選擇性。
c.使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法可簡化手續(xù),加快分析速度。
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